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大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒的實驗使用說明書通常包含產品的基本信息、實驗原理、試劑盒內容、樣品收集與處理、操作步驟、注意事項等內容。以下是一個基于多個來源綜合整理的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒的實驗使用說明書示例:
大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒實驗使用說明書
一、產品基本信息
?產品名稱?:大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒
?品牌與產地?:根據具體品牌與產地填寫,如“本生生物,國產"
?型號與規格?:如48T/96T
?貨號?:BS-8542
?用途?:僅供科研使用,不得用于臨床診斷
?保存條件?:冷藏2-8°C
?有效期?:6個月
二、實驗原理
本試劑盒采用雙抗體夾心法測定標本中大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)水平。用純化的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)抗體包被微孔板,制成固相抗體。加入樣品后,樣品中的β2微球蛋白與固相抗體結合,再與HRP標記的β2微球蛋白抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。經過洗滌后,加入底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺與樣品中的β2微球蛋白濃度呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中β2微球蛋白的濃度。
三、試劑盒內容
試劑盒通常包含以下組分(具體數量與規格可能因品牌與規格而異):
酶標包被板
標準品及標準品稀釋液
酶標試劑
樣品稀釋液
顯色劑A液與B液
終止液
濃縮洗滌液
封板膜與密封袋
說明書
四、樣品收集與處理
?血清?:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
?血漿?:使用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
?尿液、胸腹水、腦脊液?:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
?細胞培養上清?:檢測分泌性成分時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內成分時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,通過反復凍融使細胞破壞并放出細胞內成分,再離心收集上清。
?組織標本?:切割標本后稱重,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后保持2-8℃溫度,加入PBS勻漿,離心收集上清。
樣品收集后應盡早進行提取和實驗。若不能立即實驗,可將樣品分裝后保存于-20℃或更低溫度,避免反復凍融。
五、操作步驟
?準備?:將所有試劑和組分恢復至室溫。
?加樣?:在酶標包被板上設置標準品孔、空白孔和樣本孔,加入相應量的標準品、樣本和稀釋液。
?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育一定時間(如30分鐘或60分鐘)。
?洗滌?:揭掉封板膜,棄去液體后洗滌,重復多次后拍干。
?加酶?:每孔加入酶標試劑(除空白孔外)。
?再次溫育與洗滌?:重復溫育和洗滌步驟。
?顯色?:每孔加入顯色劑A和B,避光顯色一定時間(如15分鐘)。
?終止?:每孔加入終止液終止反應。
?測定?:在酶標儀上讀取各孔的吸光度(OD值)。
六、注意事項
?操作規范?:嚴格按照說明書操作,避免交叉污染和實驗誤差。
?試劑保存?:試劑應按標簽說明書儲存,不同批號的試劑不要混用。
?樣品處理?:樣品處理過程中應避免溶血、高血脂等因素的干擾。
?結果解讀?:根據標準曲線計算樣品濃度,注意樣品的稀釋倍數。
?安全防護?:實驗中應做好個人防護,避免直接接觸有害試劑。
請注意,不同品牌與規格的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒在組分、操作步驟等方面可能有所不同,因此在使用前應仔細閱讀具體產品的說明書。